48T 96T大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒報價
一、大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒實驗原理
8月16日消息，據上海臻科午間發表：大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠游離睪酮(F-TESTO)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠游離睪酮(F-TESTO)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
二、大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒產品優勢
1、優點明顯 產品具有靈敏度高、特異性強的特點，具有穩定的重復性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測，方法簡單，操作方便，最大限度的節省了實驗經費。
2、品質保障 產品保證質量，出庫質檢把控嚴格，保障提供給客戶的100%是優質產品，運輸全程跟蹤，公司承諾有任何質量問題包退換，誠信經營，合作共贏。
3、專業定制 應市場需求公司特推出專業定制elisa試劑盒的服務，全程有專業的技術老師跟蹤并和客戶保持溝通，直到定制成功為止。
4、免費代測 公司承諾訂購ELISA試劑盒，享全程技術指導并可免費代測，為您分憂。全程有專業技術老師負責代測，收到樣本一般7個工作日出結果。
5、服務周到 設立售后服務中心，24小時及時響應，真正做到后顧無憂，不斷完善服務體系。
三、大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒標本要求
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
四、大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
五、大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒注意事項
1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
六、關于大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒其他相關試劑
ZK-00461 人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA檢測試劑盒
ZK-01921 人鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA檢測試劑盒
ZK-05471 兔組織因子通道抑制因子(TFPI)ELISA檢測試劑盒
ZK-00590 人白介素11(IL-11)ELISA檢測試劑盒
ZK-03181 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA檢測試劑盒
ZK-09430 羊膽固醇（CH）酶聯免疫分析試劑盒
ZK-01181 人黑色素瘤相關抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA檢測試劑盒
ZK-05336 兔血小板選擇素(P-Selectin)ELISA檢測試劑盒
ZK-08517 牛神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測試劑盒
ZK-01653 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA檢測試劑盒
ZK-05000 馬白介素18(IL18)ELISA檢測試劑盒
ZK-10341 雞細胞角蛋白18(CK－－18)ELISA檢測試劑盒
ZK-02782 人轉化生長因子β受體3(TGFBR3)ELISA檢測試劑盒
ZK-06582 犬免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA檢測試劑盒
ZK-01132 人胱天蛋白酶1(Casp-1)ELISA檢測試劑盒
ZK-03293 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒
ZK-08207 斑馬魚轉化生長因子β1(TGFβ1)ELISA檢測試劑盒
ZK-01496 人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)ELISA檢測試劑盒
ZK-04653 植物b-類胡蘿卜素ELISA檢測試劑盒
ZK-10077 雞膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA檢測試劑盒
ELISA試劑盒專業代測人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒@新品新聞
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一、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒實驗原理
8月9日消息，據上海臻科午間發表：人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
二、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒產品優勢
1、優點明顯 產品具有靈敏度高、特異性強的特點，具有穩定的重復性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測，方法簡單，操作方便，最大限度的節省了實驗經費。
2、品質保障 產品保證質量，出庫質檢把控嚴格，保障提供給客戶的100%是優質產品，運輸全程跟蹤，公司承諾有任何質量問題包退換，誠信經營，合作共贏。
3、專業定制 應市場需求公司特推出專業定制ELISA試劑盒服務，全程有專業的技術老師跟蹤并和客戶保持溝通，直到定制成功為止。
4、免費代測 公司承諾訂購ELISA試劑盒，享全程技術指導并可免費代測，為您分憂。全程有專業技術老師負責代測，收到樣本一般7個工作日出結果。
5、服務周到 設立售后服務中心，24小時及時響應，真正做到后顧無憂，不斷完善服務體系。
三、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒標本要求
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
四、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
五、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
六、人睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒酶聯免疫分析試劑盒常見問題分析
ELISA試劑盒用戶：為什么96T 的試劑盒只能檢測85個樣本，測雙標準有什么好處？
臻科生物解答：去掉一個空白和10個標準孔，96T 只能檢測85個樣本。雙標準對照會比單標準測的更加精確。
ELISA試劑盒用戶：elisa試劑盒不知道濃度怎么辦？
臻科生物解答：每個試劑盒都是有對應的檢測范圍，比如試劑盒的范圍50-1800Pg/ml ，如果樣本高于這個檢測范圍就需要稀釋，如果低于這個檢測范圍那就測不出來了。實驗前可以先做個預實驗摸索下檢測范圍。
ELISA試劑盒用戶：ELISA試劑盒用什么儀器 對使用什么樣的儀器有具體要求嗎？
臻科生物解答：ELISA試劑盒檢測是配套酶標儀的，對酶標儀沒有要求。
ELISA試劑盒用戶：生物試劑與ELISA試劑盒的分別不同在哪?
臻科生物解答：ELISA試劑盒就是把該實驗需要的試劑按一定用量和比例組合起來的成品.一般都是按做多少次的用量包裝.生物試劑那就多了,包裝大小也五花八門.
ELISA試劑盒用戶：elisa試劑盒可以做臨床嗎？
臻科生物解答：elisa試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷，如果你是臨床的標本做課題實驗完全沒問題。 檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。
ELISA試劑盒用戶：我有98個樣本需要多少用幾個盒子？
臻科生物解答：我們試劑盒是 48T 96T 兩種規格 可以分別檢測 37 85個樣本，你需要一個 48T和一個96T 盒子。
ELISA試劑盒用戶：收集血清的時候用什么管子？
臻科生物解答：血清一般是用促凝管，普通離心管或者EP管都可以。
ELISA試劑盒用戶：ELISA試劑盒中48T和96T的區別是什么？
臻科生物解答：48T和96T代表試劑盒的規格；48T 96T 可以分別檢測37 85個樣本。
ELISA試劑盒用戶：一個孔需要多少量的血清？
臻科生物解答：每個樣本的保險量是50ul，實際上樣量是10ul考慮到損耗建議至少準備30ul的樣本。
如需了解更多，可聯系我司客服人員。
ELISA試劑盒專業代測兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒@公司動態
兔游離睪酮(F-TESTO)elisa試劑盒,兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒說明書,兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒價格一、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒實驗原理
8月10日消息，據上海臻科對行業的市場透露： 兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被兔游離睪酮(F-TESTO)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔游離睪酮(F-TESTO)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
二、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒產品優勢
1. 品種齊全、質量可靠、靈敏度高、穩定性好、操作簡便
2.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3.重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。
4.同城（上海）需要代測可免費上門取樣，享送貨上門的服務。
5.根據客戶需求可以根據客戶的要求定制ELISA試劑盒。
6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技術支持,為您解決實驗過程中遇到的問題。
三、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒標本要求
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
注：標本溶血會影響*后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
四、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒組成
| 名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×8條 | 無 |
| 標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
| 說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
| 自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
五、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒操作流程
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
六、兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒注意事項
1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5. 封板膜只限一次性使用，避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。底物請避光保存
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
七、關于兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒特別聲明
公司長期與各大高校、醫院及權威科研單位保持著良好的合作關系，公司的產品質量及服務態度得到了他們的一致認可。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供高質量高品質的產品，公司承諾如有任何質量的問題免費包退換（非人為因素造成的）。可根據客戶要求定制ELISA試劑盒，并承諾直到客戶滿意為止。如您想要了解更多技術參數可以直接聯系我司客服人員。
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
人游離睪酮(F-TESTO)elisa試劑盒上海潤裕生物科技有限公司等科研產品，我公司ELISA試劑盒和免疫組化試劑盒產品質量可靠，ELISA試劑盒(酶聯免疫分析試劑盒)專業技術團隊提供免費代測服務及售后指導。所以生物試劑產品用于科研實驗領域，如有需要請直接來電或給我們留言（半個工作日內給您回復）。
歡迎來電索取產品報價，產品說明書，潤裕生物品質服務,真誠相伴！
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
ELISA試劑盒實驗標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA試劑盒種屬齊全：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
產品運輸方面：部分現貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨
2、檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
3、服務承諾：工作時間內免費技術咨詢和指導，提供來樣檢測及免費代測服務，保證實驗結果的有效性。
4、研究領域：炎癥研究、神經生物學、腫瘤研究、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。
如果人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒所檢測的樣本不是連續的，所以實驗中不用的板條立即放回包裝中，密閉封口，4℃可保存1個 月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。在做樣本檢測前要有一個完整的計劃，如標本編號、所測項目、目的等。操作時盡量使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
主要分為以下系列：
1、細胞因子檢測試劑盒
2、內分泌檢測試劑盒
3、肝纖維化檢測試劑盒
4、心肌梗塞檢測試劑盒
5、腫瘤標志物檢測試劑盒
6、自身免疫檢測試劑盒
7、優生優育檢測試劑盒
8、傳染病檢測試劑盒等等。
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒注意事項
1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒實驗中，選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的，其中包括:
(1) 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
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人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
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人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒產品信息：
英文名稱：Human Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit
產品貨號：SBJ-H1002
品牌：森貝伽
產品規格：96T/48T
保存：2-8℃,避光保存
庫存狀態：現貨供應
有效期：六個月
注：僅用于科研,不得用于臨床診斷
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：
1）血清－－－－-操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2）血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒操作注意事項：
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
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