人補體7(C7)ELISA試劑盒 免費代測,現(xiàn)貨供應。
規(guī)格:96T
英文名稱:Human Complement 7,C7 ELISA Kit
性狀:盒裝液體
使用類型:科研
人補體7(C7)ELISA試劑盒 價格,質(zhì)量具有絕對優(yōu)勢,送貨上門。
我公司產(chǎn)品優(yōu)勢:1、、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復性和性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;5、種屬齊全:人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、猴(Monkey)、兔(Rabbit)、豬(Pig)、馬(Horse)、魚、雞、鴨、羊等等;6、可檢測指標齊全:細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內(nèi)分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等;7、最大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費;選擇余地8、進口分裝:的實驗結果,且還具有優(yōu)廉的價格,更經(jīng)濟實惠;9、原裝進口:的質(zhì)量,高的靈敏度、精密度、重現(xiàn)性、特異性,幫您在實驗室更加節(jié)省時間;的技術服務10、從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術指導
人補體7(C7)ELISA試劑盒 更多產(chǎn)品有:
編號 | 規(guī)格 | 中文名稱 | 英文名稱 |
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人補體7(C7)ELISA試劑盒 檢測試劑盒
英文名稱:Human Complement 7,C7 ELISA Kit
貨 期:現(xiàn)貨
主要用途:科研檢測
用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
說明書:人補體7(C7)ELISA試劑盒 說明書 歡迎來電索取產(chǎn)品說明書
提供實驗代測服務.您只需將需要檢測的種屬(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)和檢測指標(介素類、因子類)及標本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務員即可。在接到客戶標本當日起,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中!
人補體7(C7)ELISA試劑盒 組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
|
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
|
密封袋 | 1個 | 1個 |
|
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 30ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
人補體7(C7)ELISA試劑盒 檢測試劑盒 提供免費代測服務,一周內(nèi)出結果,更多Elisa試劑盒保證質(zhì)量
WRM-52 WRN-52 WRE-52 WRC-52 活動管接頭式熱電偶(防噴式)活動管接頭式熱電偶(防噴式)活絡管接頭式裝配熱電偶主要應用裝配熱電偶通常和顯示儀表、記錄儀表、電子計算機等配套使用。直接測量各種生產(chǎn)過程中的0度-1300度范圍內(nèi)液體、蒸汽和氣體介質(zhì)以及固體表面溫度。裝配式熱電偶特點1、裝配簡單,更換方便;2、壓簧式感溫元件,抗振性能好;3、測量范圍大;4、機械強度高,耐壓性能好。活絡管接頭式熱電偶安裝要求對熱電偶與熱電阻的安裝,應注意有利于測溫,安全可考及維修方便,而且不影響設備運行和生產(chǎn)操作.要滿足以上要求,在選擇對熱電偶和熱電阻的安裝部位和插入深度時要注意以下幾點: 1、為了使熱電偶和熱電阻的測量端與被測介質(zhì)...活絡管接頭式裝配熱電偶主要應用裝配熱電偶通常和顯示儀表、記錄儀表、電子計算機等配套使用。直接測量各種生產(chǎn)過程中的0度-1300度范圍內(nèi)液體、蒸汽和氣體介質(zhì)以及固體表面溫度。裝配式熱電偶特點1、裝配簡單,更換方便;2、壓簧式感溫元件,抗振性能好;3、測量范圍大;4、機械強度高,耐壓性能好。活絡管接頭式熱電偶安裝要求對熱電偶與熱電阻的安裝,應注意有利于測溫,安全可考及維修方便,而且不影響設備運行和生產(chǎn)操作.要滿足以上要求,在選擇對熱電偶和熱電阻的安裝部位和插入深度時要注意以下幾點: 1、為了使熱電偶和熱電阻的測量端與被測介質(zhì)之間有充分的熱交換,應合理選擇測點位置,盡量避免在閥門,彎頭及管道和設備的附近裝設熱電偶或熱電阻。 2、帶有保護套管的熱電偶和熱電阻有傳熱和散熱損失,為了減少測量誤差,熱電偶和熱電阻應該有足夠的插入深度: (1)對于測量管道中心流體溫度的熱電偶,一般都應將其測量端插入到管道中心處(垂直安裝或傾斜安裝).如被測流體的管道直徑是200毫米,那熱電偶或熱電阻插入深度應選擇100毫米; (2)對于高溫高壓和高速流體的溫度測量(如主蒸汽溫度),為了減小保護套對流體的阻力和防止保護套在流體作用下發(fā)生斷裂,可采取保護管淺插方式或采用熱套式熱電偶,淺插式的熱電偶保護套管,其插入主蒸汽管道的深度應不小于75mm;熱套式熱電偶的標準插入深度為100mm; (3)假如需要測量是煙道內(nèi)煙氣的溫度,盡管煙道直徑為4m,熱電偶或熱電阻插入深度1 m即可; (4)當測量原件插入深度超過1m時,應盡可能垂直安裝,或加裝支撐架和保護套管。活絡管接頭式熱電偶產(chǎn)品用途:K型熱電偶作為一種溫度傳感器,K型熱電偶通常和顯示儀表,記錄儀表和電子調(diào)節(jié)器配套使用。K型熱電偶可以直接測量各種生產(chǎn)中從0℃到1300℃范圍的液體蒸汽和氣體介質(zhì)以及固體的表面溫度。K型熱電偶通常由感溫元件、安裝固定裝置和接線盒等主要部件組成。活絡管接頭式熱電偶主要技術參數(shù) ○產(chǎn) 品執(zhí)行標準 IEC751 JB/T8622-1997 JB/T8623-1997 ○常溫絕緣電阻 熱電阻在環(huán)境溫度為15~35℃,相對濕度不大于80%,試驗電壓為10~100V(直流)電極與外套管之間的絕緣電阻≥100MΩ。裝配熱電偶,鎧裝熱電偶,端面熱電偶,壓簧固定熱電偶,高溫熱電偶,鉑銠熱電偶,防腐熱電偶,耐磨熱電偶,高壓熱電偶,特殊熱電偶,手持式熱電偶,微型熱電偶,貴金屬熱電偶,快速熱電偶,鎢錸熱電偶,單芯鎧裝熱電偶等等
人補體7(C7)Elisa試劑盒,現(xiàn)貨供應,款到即可發(fā)貨,快遞時間3天左右。
規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃低溫保存庫存:現(xiàn)貨供應保質(zhì)期:六個月運輸:快遞運輸(可根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式,無特殊要求我公司一般為中通或韻達)用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
本公司的ELISA試劑盒,品質(zhì)高,靈敏度好,曲線漂亮,無效包退包換,還可提供免費代測服務,各種種屬、各種系列ELISA科研實驗檢測試劑盒,詳情可來電咨詢我公司銷售人員或咨詢我公司在線客服QQ。
人補體7(C7)Elisa試劑盒,操作步驟:1.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 2.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用3.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。4.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 5.溫育:6.洗滌:
人補體7(C7)Elisa試劑盒,注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
人補體7(C7)Elisa試劑盒,樣本收集與前期準備
利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一) 臨床樣本的收集A、血液樣本 有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。1.外周血 一般選取左手無名指內(nèi)側采血,該部位應無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。2.靜脈血 除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。
B、尿液樣本 同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,最少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本。
C、糞便樣本 糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。
D、腦脊液樣本 腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變性,破壞,導致計數(shù)和分類不準;有些化學物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,管作細菌培養(yǎng),第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全。
E、胸腹水樣本 與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學檢查,一管生化檢查,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。
F、前列腺液樣本 前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。
G、精液樣本 精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
H、陰道分泌物樣本
陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
歡迎新老客戶前來咨詢各種屬各指標各樣本的Elisa試劑盒報價,Elisa試劑盒價格,Elisa試劑盒說明書,Elisa試劑盒技術,Elisa試劑盒售后,Elisa試劑盒免費代測詳情來電咨詢,聯(lián)系方式請點擊該網(wǎng)站所顯示聯(lián)系方式電話,QQ即可。:人補體7(C7)Elisa試劑盒.
Elisa試劑盒現(xiàn)貨產(chǎn)品,上海地區(qū)免費送貨,外地客戶(發(fā)貨方式:快遞、 航空 、EMS等),1-3天到貨。公司ELISA試劑盒產(chǎn)品免費快遞、免費代測,廠價銷售。小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒公司主打產(chǎn)品:小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA試劑盒小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA試劑盒小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse major histocompatibility complex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA試劑盒小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse E-Cadherin,E-Cad ELISA試劑盒小鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA試劑盒小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA試劑盒小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA試劑盒小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Eotaxin 1 ELISA試劑盒小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Erythropoietin,EPO ELISA試劑盒小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse E-Selectin ELISA試劑盒小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Factor-related Apoptosis,FAS ELISA試劑盒小鼠Slit2 ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Slit2 ELISA試劑盒 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA試劑盒小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA試劑盒小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA試劑盒小鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Procalcitonin,PCT ELISA試劑盒小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA試劑盒小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA試劑盒 小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒,小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin-7,IL-7 ELISA試劑盒小鼠褪黑素(MT)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Melatonin,MT ELISA試劑盒小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒, Mouse Apolipoprotein H,Apo-H ELISA試劑盒 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 規(guī)格: 48T/96T 包裝: 盒裝 保存: 2-8℃ 用途: 科研 種屬: 人、小鼠、大鼠等其它動植物 標本: 血清或血漿等其它標本 樣品稀釋: 48孔配置(3 ml×1瓶) 96孔配置(6 ml×1瓶)
20TAC47BSUC10PN7B25TAC62BSUC10PN7B30TAC62BSUC10PN7B35TAC72BSUC10PN7B40TAC72BSUC10PN7B40TAC90BSUC10PN7B45TAC75BSUC10PN7B45TAC100BSUC10PN7B50TAC100BSUC10PN7B
25TAC62BDBC10PN7A AS2SQ25TAC62BSUC10PN7B AS2SQ30TAC62BDBC10PN7A AS2SQ30TAC62BSUC10PN7B AS2SQ35TAC72BSUC10PN7B AS2SQ40TAC72BSUC10PN7B AS2SQ40TAC90BSUC10PN7B AS2SQ45TAC100BSUC10PN7B AS2SQ45TAC75BSUC10PN7B AS2SQ50TAC100BSUC10PN7B AS2SQ
人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒等相關ELISA試劑盒產(chǎn)品說明書下載地址:http://www.shxysw.net/shxysw-Article/ 注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。
5. 如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 產(chǎn)品保存條件:低溫
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
提供實驗代測服務
特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
有效期:6個月
預期應用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結果造成任何影響。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。